

測蛋清和蛋黃中溶菌酶,,TC,TG和MDA等指標(biāo)樣本怎么處理?
發(fā)布時(shí)間:2014/2/7 16:57:10 瀏覽次數(shù):4259 [字號:大 中 小] [關(guān)閉此頁 打印此頁]
要測蛋清和蛋黃中溶菌酶,,TC,TG和MDA等指標(biāo)。我查到了文獻(xiàn)如下。
1、蛋清溶液的溶菌酶測定
蛋清用0.9%氯化鈉稀釋,乙酸調(diào)溶液至pH 4.5,77℃水浴10 rain后取出,靜置1 h。離心取上清,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的操作測得OD絲。值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算蛋清溶液中溶菌酶的含量(C),再乘以稀釋倍數(shù)即為蛋清中溶菌酶的含量(P)。
其他的不知道怎么方法測?當(dāng)時(shí)我買試劑盒的時(shí)候,說清楚要測雞蛋的如上指標(biāo),但是發(fā)過來的試劑盒里面沒有詳細(xì)的說明書,請你盡快吧詳細(xì)的說明書和方法發(fā)給我吧,我現(xiàn)在只等著,盡快吧。謝謝。。。
回復(fù):對于您說的這幾個(gè)指標(biāo),我們都是粗提取后進(jìn)行測定就可以了,并不需要進(jìn)行純化,
因此我們的目的只需要將我們要測的物質(zhì)提取到液體中便可。
對于TC、TG、MDA的測定,老師可統(tǒng)一用無水乙醇進(jìn)行提取,如準(zhǔn)確吸取蛋黃或蛋清體積1ml,加入4倍體積的無水乙醇(由于無水乙醇易揮發(fā)可選擇5ml或10ml帶蓋的EP管中操作),旋渦混勻器上充分混勻(抽提),3500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清進(jìn)行測定
對于溶菌酶的提取,雖然說溶菌酶在弱酸性條件下活力最好,其次又耐高溫,但是我們并不需要如此操作,一般推薦直接用0.1mol/L pH7~7.4磷酸鹽緩沖液或生理鹽水直接提取便可,如準(zhǔn)確吸取蛋黃或蛋清體積1ml,加入4倍體積的緩沖液,旋渦混勻器上充分混勻(抽提),3500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清進(jìn)行測定
對于TC、TG的測定我之前都做過,但對于MDA、LZM的測定我們之前沒有做相關(guān)的樣本,僅是推薦。
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