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有關(guān)羥自由基試劑盒的幾個(gè)問(wèn)題

發(fā)布時(shí)間：2014/2/8 9:23:05　瀏覽次數(shù)：3511　[字號(hào)：大 中 小]　 [關(guān)閉此頁(yè)　打印此頁(yè)]

近期對(duì)其中相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行了探索，對(duì)其中有些問(wèn)題心存疑惑，考慮到近期試驗(yàn)的需要，望盡快解答。

有關(guān)羥自由基試劑盒的幾個(gè)問(wèn)題：

第一，多次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（包括標(biāo)準(zhǔn)管、對(duì)照管等）的平行性不是很好，不同時(shí)間測(cè)定相應(yīng)結(jié)果有時(shí)相差較大，請(qǐng)問(wèn)這點(diǎn)如何解決？

第二，考慮到羥自由基本身的一些原因，請(qǐng)問(wèn)測(cè)定中主要需注意什么問(wèn)題??？比如測(cè)定時(shí)間，測(cè)定條件等。

第三，在探索最佳濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)同樣存在平行性較差的情況，而且，再次探索最佳濃度時(shí)，發(fā)現(xiàn)最佳濃度發(fā)生了變化。請(qǐng)問(wèn)是不是此后每次試驗(yàn)前必須先進(jìn)行最佳濃度的探索，而后才能進(jìn)行正式樣品的大批量測(cè)定？

有關(guān)GR（谷胱苷肽還原酶）的測(cè)定：

近期試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，2分30秒測(cè)定的吸光度與30秒測(cè)定的吸光度差值較小，一般在0.005左右，考慮到染毒試驗(yàn)，請(qǐng)問(wèn)染毒后差值是否會(huì)有顯著變化？也就是GR活性是否會(huì)有較顯著變化？

回復(fù)：

羥自由基試劑盒操作確實(shí)要求較高，由于反應(yīng)時(shí)間較短，對(duì)樣本加入量的準(zhǔn)確性，控制反應(yīng)的時(shí)間，要求都較高！同時(shí)樣本的穩(wěn)定性也不好，所以制備好勻漿后（破碎細(xì)胞后），2-8℃冷藏盡快完成檢測(cè)（不可過(guò)夜）！

批量檢測(cè)之前需要做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳樣本濃度！查我們檢測(cè)記錄，出現(xiàn)平行較差的情況，一般有3點(diǎn)：1、樣本及試劑二加入量有誤差；2、反應(yīng)時(shí)間控制有偏差；3、樣本存放時(shí)間偏長(zhǎng)，勻漿不均一，導(dǎo)致加樣有偏差！

GR測(cè)定，如果2次OD變化值太小，也就是樣本中的GR表達(dá)較低，如需改善，一般有2點(diǎn)：1、加大樣本濃度或取樣量；2、延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間！

心肌灌注的冠脈流出液中的LDH和CK的測(cè)定

細(xì)胞膜上和肌漿網(wǎng)上的鈣-ATPase測(cè)定的問(wèn)題？